SunRed 醋酸 细胞活性检测

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产品优势

可与绿色活性染料（如 FITC 或 Alexa Fluor 488 标记的抗体）联合使用

适用范围

用于细胞活性检测

产品介绍

酯酶催化的 Sun Red 乙酸酯（SRA）水解反应会生成 Sun Red 荧光团，该荧光团可被 633 纳米激光激发，发射波长约为 660 纳米。Sun Red 的荧光可通过 Cy5 滤光片组轻松检测，而大多数商用荧光仪器通常都配备该滤光片组。

尽管 Sun Red 在 633 纳米处易被激发并发出约 660 纳米的红色荧光，但 SRA 在 633 纳米处的吸收非常微弱，且无红色发射，这使得 SRA 成为最灵敏的近红外酯酶底物之一。SRA 为细胞活力检测提供了第二种颜色，而常用的荧光素颜色可用于其他细胞功能检测。

SRA是一种非荧光的疏水性化合物，能够穿过细胞膜。进入细胞后，细胞内的酯酶会水解其乙酸酯基团，生成高荧光性的产物 Sun Red。Sun Red 分子会在细胞膜完整的细胞中积累，因此这种深红色荧光可作为细胞活力的标志物。细胞膜不完整或代谢不活跃的细胞可能无法积累该荧光产物，因此不会发出深红色荧光。SRA 可与绿色活性染料（如 FITC 或 Alexa Fluor 488 标记的抗体）联合使用。

适用仪器

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞

2.去除培养基

3.添加SunRed 醋酸酯工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

4.在37°C，5％CO2培养箱中孵育1小时

5.用HHBS清洗并更换工作溶液

6.读取Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度（截止640 nm）

储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融。

SunRed 醋酸盐储备液（2至10 mM）

用 DMSO 制备 2 - 10 mM 的 SunRed™乙酸酯储备液。储备液应立即使用。

工作溶液

SunRed 醋酸盐工作溶液

实验前，用1X Hank盐溶液（含有20 mM Hepes缓冲液，即HHBS）或您选择的缓冲液制备5-10μM的SunRed 醋酸盐工作溶液。

有关细胞样品制备的指南，请访问：https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

实验方案示例

1.移除细胞中的培养基

2.向 96 孔板每孔加入 100 μL、384 孔板每孔加入 25 μL SunRed™乙酸酯工作液。

3.将含有 SunRed™乙酸酯工作液的培养板在室温或 37°C 下孵育 1 小时，期间避光。合适的孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度，需为每个实验优化孵育时间。对于非贴壁细胞，建议孵育后将培养板以 800 rpm 离心 2 分钟

4.监测Ex / Em = 620 / 660nm（截止640nm）处的荧光强度，