锌离子荧光探针Zinquin AM

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产品优势

高特异性识别：专一性结合游离锌离子（Zn²⁺），对Ca²⁺/Mg²⁺等二价金属离子干扰极低，信噪比优异。

适用范围

用于锌离子检测

产品介绍

Zinquin AM酯是一种脂溶性锌离子荧光探针，具有锌离子敏感性和细胞膜穿透性。该探针能够在活细胞内长期滞留，这是因为其AM酯基团会被胞质酯酶水解，生成带负电荷的Zinquin分子，从而阻止其通过细胞膜外排。

Zinquin荧光探针可通过含有5-40 μM Zinquin AM酯的培养液（使用含钙镁离子的PBS或普通培养基配制）负载至细胞内。通常情况下，细胞需要在37℃条件下与探针孵育15-30分钟。具体的负载浓度、时间和温度需根据实验目的和细胞类型进行优化。负载完成后，需用PBS或培养液洗涤细胞以去除残留的胞外染料。处理后的细胞可在显微镜下观察，或用于共聚焦显微镜、流式细胞术（FACS）及荧光分光光度分析。

锌是人体内含量第二丰富的过渡金属元素，作为催化、结构和调控离子发挥着关键作用。锌离子参与维持机体稳态、免疫应答、氧化应激、细胞凋亡和衰老等重要生理过程。研究表明，锌离子既能作为突触前神经元的神经递质，又能作为跨膜信号分子影响突触后神经元。锌代谢异常与多种神经系统疾病相关，包括阿尔茨海默病、帕金森病和癫痫等。

目前，荧光成像技术已被证实是监测体内锌离子动态的方法。该技术能够直观、灵敏地反映锌离子的分布和浓度变化，为相关研究提供了强有力的工具。

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液
 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Zinquin AM * UltraPure级*原液。
2.1使用的Zinquin AM * UltraPure等级*的量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Zinquin AM * UltraPure级*与1090.56μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMZinquinAM * UltraPure等级* 2在HHBS中制备2X工作溶液
3.1Zinquin AM * UltraPure等级的终井内浓度*：5μM
3.2在合适的容器中混合16μL的Zinquin AM * UltraPure等级*。然后，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2毫升。
注意：对于大多数细胞系，我们建议Z​​inquin AM * UltraPure等级的终浓度为4至5μM。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至以下：5μMZinquinAM * UltraPure等级*
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育30-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入HHBS或您选择的缓冲液，直至体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 360/480 nm运行实验。

参考文献

Zinquin identifies subcellular compartmentalization of zinc in cortical neurons. Relation to the trafficking of zinc and the mitochondrial compartment
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S-Nitroso compounds interfere with zinc probing by Zinquin
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Flux of intracellular labile zinc during apoptosis (gene-directed cell death) revealed by a specific chemical probe, Zinquin
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Measurement of zinc in hepatocytes by using a fluorescent probe, zinquin: relationship to metallothionein and intracellular zinc
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