四种氯离子探针的性质对比及使用推荐
四种用于测量氯离子 (Cl⁻) 的荧光指示剂:SPQ(#21252), MQAE (#21255), MEQ (#21250) 和 Lucigenin (#21259)的总结对比及应用。
一、背景 囊性纤维化的遗传效应通过 Cl⁻ 转运的变化表现出来,这一发现推动了细胞内 Cl⁻ 浓度的测量和 Cl⁻ 通道的研究。然而,目前大多数研究细胞 Cl⁻ 转运动力学的方法都存在严重局限。基于 36Cl 测量的方法由于该同位素比活度低而灵敏度差;微电极 Cl⁻ 选择性差且只能用于大细胞。荧光指示剂被证明比传统方法更灵敏、选择性更高,并且在某些情况下可以非侵入性地加载到细胞中。 百萤提供了四种氯离子荧光指示剂可检测溶液/细胞内氯离子的浓度。
二、四种氯离子荧光指示剂的物理性质
三、四种氯离子荧光指示剂的对比
关键对比点总结: 1.灵敏度 (Ksv): Lucigenin (溶液) > MQAE > MEQ > SPQ。细胞内灵敏度普遍低于溶液值,MQAE和MEQ在细胞内灵敏度相对较高。 2.加载方式: MEQ 通过其前体 dHI-MEQ 提供非侵入性加载的优势,这对活细胞实验更友好。SPQ 和 MQAE 通常需要渗透法(如低渗休克)。 3.细胞内保留: MEQ 被强调在细胞内保留优于 SPQ 和 MQAE。MQAE 泄漏率相对较高。 4.干扰: MQAE 对 pH 和多种阴离子(碳酸氢根、硼酸根、硝酸根、硫酸根)不敏感,是其优点(但仍受磷酸根/羧酸盐影响)。SPQ 在特定缓冲液中可能受 pH 影响。Lucigenin 对硝酸根、磷酸根、硫酸根不敏感。 5.适用性: a.细胞内 Cl⁻: SPQ, MQAE, MEQ 均可,MEQ 在保留性和非侵入加载上有优势。 b.脂质体/膜囊泡: Lucigenin 是首选,MQAE 也可用。 c.Cl⁻ 外流测量: Lucigenin 适合(需突然移除胞外 Cl⁻)。 d.流式/共聚焦 (UV 激发): SPQ, MQAE, MEQ 都适用。 |