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蛋白与蛋白交联(Protein to Protein Conjugation)(Buccutite)

 

 Buccutite 交联技术

Buccutite 交联技术提供了一种真正独特且易操作的方法,可以用另一种大分子(如酶或藻胆蛋白)标记抗体。 与蛋白质-蛋白质结合的传统技术(例如SMCC 化学标记方法)相比,Buccutite 结合明显更加稳定且要求更低。这些试剂盒可在不到两小时的时间内对微克或毫克量的抗体进行最佳标记,无需纯化,抗体回收率为 100%。 使用 Buccutite 标记试剂盒,常规制备共价标记的偶联物,这些偶联物可以耐受典型免疫测定(例如 ELISA、IHC 和蛋白质印迹)或流式细胞术应用所需的严格处理和洗涤。我们提供 Buccutite 抗体标记试剂盒,用于制备辣根过氧化物酶 (HRP)、碱性磷酸酶 (AP)、PE、APC、PerCP 和串联染料抗体偶联物。

Buccutite 与 SMCC对比

共轭 Buccutite™ Kits SMCC Conjugation
最低抗体浓度 100 µg/mL 0.5 to 5 mg/mL
标记化学 使用两个专有接头 Buccutite MTA 和 Buccutite FOL,以促进蛋白质-蛋白质缀合。 使用异双功能交联剂促进蛋白质-蛋白质缀合。
可用标签 PE、APC、串联染料、HRP、Poly-HRP 和 AP。 货号1315 可用于偶联任意两种蛋白质。 用户负责提供蛋白质,适用于任何蛋白质-蛋白质偶联的方法
标签和抗体之间的键类型 共价 共价
与 BSA 或其他稳定剂兼容吗? 不兼容 不兼容
需要纯化吗? 不需要 需要
共轭所需的时间 2小时 4小时以上
手动操作时间 15分钟 2小时
共轭产量 100 % ∼30%
批次间差异 极小
应用 FC, IF, IHC, WB, ELISA FC, IF, IHC, WB, ELISA


 

Buccutite HRP 和 Poly-HRP 抗体标记试剂盒

Buccutite 过氧化物酶 (HRP) 抗体标记试剂盒使研究人员能够在不到 2 小时的时间内使用检测酶辣根过氧化物酶 (HRP) 高效标记一抗。 为了简化流程,这些试剂盒中提供的 HRP 使用我们专有的接头 Buccutite FOL 进行了预激活,并可直接用于抗体偶联。 只需使用每个试剂盒中提供的 Buccutite MTA 接头激活您想要标记的抗体或蛋白质,然后与 Buccutite FOL 激活的 HRP 混合即可。 由此产生的酶标抗体偶联物是各种免疫分析应用的理想选择,包括 ELISA、IHC 和蛋白质印迹,并且对于长期储存非常稳定。 Buccutite 过氧化物酶抗体标记试剂盒提供三种规格,针对每次标记反应标记 25 µg、100 µg 和 1 mg 抗体进行了优化。

对于需要更高灵敏度的应用,我们提供 Buccutite Poly-HRP 抗体标记试剂盒。 这些试剂盒能够将抗体直接标记到 HRP 聚合物上,从而产生具有最高灵敏度和信噪比的偶联物。 Poly-HRP 偶联物非常适用于目标丰度低或样品量有限的应用。

 

图1. Buccutite 过氧化物酶 (HRP) 抗体标记试剂盒工作流程

 

Buccutite HRP 和 Poly-HRP 抗体标记试剂盒的主要特点

  1. 1.可以有效且高效地标记低至 100 µg/mL 的抗体浓度(SMCC 至少需要 1 mg/mL)
    2.标记抗体可在 2 小时内准备就绪,手动操作时间仅需约 15 分钟
    3.简单的两步混合方案可减少批次间的差异
    4.无需柱纯化步骤
    5.100% 缀合产率
    6.缀合物可长期储存(4 °C,12 个月)
    7.缀合物可用于 ELISA、IHC、印迹、苯乙烯酰胺信号放大和 TSA 成像

Lightning-Link HRP 标记试剂盒的高性能替代品

 

图2. 使用 Buccutite 过氧化物酶抗体标记试剂盒和 Lightning-Link® HRP 抗体标记试剂盒制备的 HRP-山羊-抗小鼠 IgG 缀合物生成直接 ELISA 曲线。

 

表1. Buccutite 过氧化物酶抗体标记试剂盒设计用于用 HRP 和聚 HRP 标记抗体

产品名称 标记量 规格 货号
Buccutite 过氧化物酶 (HRP) 抗体偶联试剂盒 适合标记 25µg 蛋白 2 Labelings 5505
Buccutite 过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒 适合标记 100µg 蛋白 2 Labelings 5503
Buccutite 过氧化物酶 (HRP) 抗体偶联试剂盒 适合标记 1mg 蛋白 1 Labeling 5504
Buccutite 过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白 5 Labeling 5504
Buccutite 聚HRP抗体偶联试剂盒 适合标记50µg蛋白 1 Labeling 5518
Buccutite 聚HRP抗体偶联试剂盒 适合标记50µg蛋白 2 Labelings 5519

 

Buccutite Rapid PE、APC、PerCP 和串联染料抗体标记试剂盒

藻胆蛋白,例如藻红蛋白 (PE)、别藻蓝蛋白 (APC) 和多甲藻黄素-叶绿素蛋白 (PerCP),能够产生比任何市售合成荧光团更亮的荧光信号。当与具有生物学特异性的分子(例如抗体、蛋白 A 或链霉亲和素)结合时,藻胆蛋白会产生异常发光的探针,这些探针在需要高灵敏度但不具有光稳定性的荧光成像应用(主要是流式细胞术、FACS 和免疫表型分析)中取得了相当大的成功。此外,藻胆蛋白可以用小的有机荧光团标记以产生具有超长斯托克位移的串联染料,用于使用单个激发源进行多参数分析。例如,FITC、PE、PE-Cy5 和 PE-Cy7 是多参数分析的理想选择,因为可以使用 488 nm 激光线同时激发所有四种荧光团,并且它们都表现出出色的光谱分离。

Buccutite 快速抗体标记试剂盒可以快速轻松地制备用于流式细胞术的抗体。 使用简单的两步混合方案,研究人员可以在不到 2 小时的时间内直接将 PE、APC、PerCP 或串联染料与任何抗体或蛋白质偶联。 无需柱纯化,因此您的回收率始终为 100%。 Buccutite 快速抗体标记试剂盒提供三种规格,针对每次标记反应标记 25 µg、100 µg 或 1 mg 抗体进行了优化。

图3. Buccutite 快速抗体标记试剂盒工作流程

 

Buccutite 快速抗体标记试剂盒的主要特点

  1. 1.可以有效且高效地标记低至 100 µg/mL 的抗体浓度(SMCC 至少需要1 mg/mL)
    2.标记抗体可在 2 小时内准备就绪,手动操作时间仅需约 15 分钟
    3.简单的两步混合方案可减少批次间的差异
    4.无需柱纯化步骤
    5.100% 缀合产率
    6.缀合物可长期储存(4 °C,12 个月)

Lightning-Link 标记试剂盒的高性能替代品

图4. 人 PBMC 细胞的流式细胞术分析

试剂盒 CD4(SK3)-缀合 染色指数
Buccutite试剂盒 CD4-PE 缀合物 55
Lightning-Link试剂盒 CD4-PE 缀合物 28

表2. Buccutite 过氧化物酶抗体标记试剂盒,用 HRP 标记抗体

产品名称 标记量 Ex (nm) Em (nm) 规格 货号
Buccutite RPE抗体标记试剂盒  标记25ug抗体 565 575 2 Labelings 1312
Buccutite RPE抗体标记试剂盒 标记100ug抗体 565 575 2 Labelings 1310
Buccutite PE-Texas Red抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 565 600 2 Labelings 1343
Buccutite PE-Texas Red抗体标记试剂盒 标记100ug抗体 565 600 2 Labelings 1318
Buccutite APC抗体标记试剂盒  标记25ug抗体 651 662 2 Labelings 1313
Buccutite APC抗体标记试剂盒  标记100ug抗体 651 662 2 Labelings 1311
Buccutite PE-Cy5抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 565 674 2 Labelings 1340
Buccutite PE-Cy5抗体标记试剂盒 标记100ug抗体 565 674 2 Labelings 1322
Buccutite PerCP抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 482 677 2 Labelings 1353
Buccutite PerCP抗体标记试剂盒 标记100ug抗体 标记100ug抗体 482 677 2 Labelings 1325

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