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经典荧光染料和iFluor篇:如何从经济高效方面选择iFluor和经典荧光染料?

 

iFluor系列产品是百萤的特色产品之一。它是高水溶性荧光染料,用于生物分子的共价标记,如蛋白质和抗体等。它可根据对应的光谱来替换罗丹明,花青素等经典的荧光染料。从实验效果来看iFluor系列产品的稳定性,荧光效果要高于经典荧光染料,但由于技术的原因,iFluor系列产品的价格略高于经典荧光染料。

产品选择建议1.如果您考虑实验成本问题,建议您使用经典荧光染料;2.如果您为了更好的实验效果,建议您使用iFluor系列染料,iFluor系列荧光染料更多用于复杂的生物应用中。


 

经典荧光染料

在经典的标记染料中,香豆素,荧光素,罗丹明和花青是最常见的荧光团。例如,FITC(异硫氰酸荧光素)是一种荧光素衍生物,是最流行的荧光标记染料之一,主要用于制备多种荧光生物缀合物。 FAM,TAMRA,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®也是流行的经典荧光标记染料,用于制备肽和寡核苷酸结合物。

  香豆素及其衍生物
  荧光素染料及其衍生物
  罗丹明染料及其衍生物
  花青染料及其衍生物
  吲哚菁绿(ICG)及其衍生物
 

 

iFluor系列荧光染料

1.iFluor染料光谱特性

iFluor 染料 Ex / Em(nm) Ext. Coeff. FQY CF at 260 nm CF at 280 nm
iFluor 350 344/488 20,000 0.95 0.83 0.23
iFluor 405 402/425 37,000 0.91 0.48 0.77
iFluor 430 433/495 40,000 0.78 0.68 0.3
iFluor 450 451/502 40,000 0.82 0.45 0.27
iFluor 488 491/516 75,000 0.9 0.21 0.11
iFluor 514 527/554 80,000 0.83 0.25 0.11
iFluor 532 543/563 90,000 0.68 0.26 0.16
iFluor 546 541/557 100,000 0.67 0.25 0.15
iFluor 555 556/569 100,000 0.64 0.23 0.14
iFluor 560 559/571 130,000 0.57 0.048 0.069
iFluor 568 568/587 100,000 0.57 0.34 0.15
iFluor 594 587/603 180,000 0.53 0.05 0.04
iFluor 610 609/627 110,000 0.85 0.32 0.49
iFluor 633 638/652 250,000 0.29 0.062 0.044
iFluor 647 654/669 250,000 0.25 0.03 0.03
iFluor 660 660/677 250,000 0.26 0.07 0.08
iFluor 670 669/682 250,000 0.63 0.019 0.024
iFluor 680 683/700 220,000 0.23 0.097 0.094
iFluor 700 690/713 220,000 0.23 0.09 0.04
iFluor 710 712/736 190,000 0.14 0.12 0.07
iFluor 750 759/777 275,000 0.12 0.044 0.039
iFluor 790 786/811 275,000 0.13 0.1 0.09
iFluor 800 801/820 250,000 0.11 0.03 0.08
iFluor 810 811/822 250,000 0.05 0.09 0.15
iFluor 820 820/849 250,000 N / D 0.11 0.16
iFluor 840 836/876 200,000 0.02 0.2 0.09
iFluor 860 852/877 250,000 N / D 0.1 0.14

 

2.iFluor反应性探针

iFluor产品的形式多种多样,它们的用途也各不相同,以下是AAT Bioquest常见的iFluor产品的几种形式及用途:

  • 琥珀酰亚胺酯:经常用于标记蛋白质、抗体、肽、核酸和其他生物分子上的伯胺(-NH3)。它们通常用于制备生物缀合物。适用范围:免疫化学、荧光原位杂交(FISH)、细胞示踪、受体标记和荧光类似物细胞化学。
  • 马来酰亚胺:用于标记硫醇或巯基(-SH)以选择性修饰指定位置的蛋白质。硫醇反应性染料通常用于制备荧光肽、蛋白质和寡核苷酸,以探测生物学结构、功能和相互作用。
  • 叠氮化物:用于通过铜(I)催化的叠氮化合物(CUAAC)或无铜(I)菌株促进的叠氮化合物点击化学(SPAAC)反应来标记亚乙基。
  • 炔烃:通过Cu(I)催化的叠氮化合物(CUAAC)或无Cu(I)菌株促进的叠氮化合物点击化学(SPAAC)反应标记叠氮化合物基团。
  • 羧酸:用于碳二亚胺预活化后的胺标记或用于醇的Steglich酯化反应
  • 胺:用于标记各种亲电子化合物,例如活化的酯。
荧光团 Ex(nm) Em(nm) 胺反应性 硫醇反应性 炔烃反应性 叠氮化物反应性 醛/酮反应性 羰基反应性
iFluor 350 344 448 iFluor 350琥珀酰亚胺酯 iFluor 350马来酰亚胺     iFluor 350酰肼 iFluor 350胺
iFluor 405 402 425 iFluor 405琥珀酰亚胺酯 iFluor 405马来酰亚胺     iFluor 405酰肼 iFluor 405胺
iFluor 430 433 495 iFluor 430琥珀酰亚胺酯 iFluor 430马来酰亚胺        
iFluor 450 451 502 iFluor 450琥珀酰亚胺酯 iFluor 450马来酰亚胺        
iFluor 488 491 516 iFluor 488琥珀酰亚胺酯 iFluor 488马来酰亚胺 iFluor 488叠氮化物 iFluor 488炔烃 iFluor 488酰肼 iFluor 488胺
iFluor 514 527 554 iFluor 514琥珀酰亚胺酯          
iFluor 532 543 563 iFluor 532琥珀酰亚胺酯 iFluor 532马来酰亚胺        
iFluor 546 541 557 iFluor 546琥珀酰亚胺酯          
iFluor 555 556 569 iFluor 555琥珀酰亚胺酯 iFluor 555马来酰亚胺 iFluor 555叠氮化物 iFluor 555炔烃 iFluor 555酰肼 iFluor 555胺
iFluor 560 559 571 iFluor 560琥珀酰亚胺酯          
iFluor 568 568 587 iFluor 568琥珀酰亚胺酯 iFluor 568马来酰亚胺        
iFluor 594 587 603 iFluor 594琥珀酰亚胺酯 iFluor 594马来酰亚胺        
iFluor 610 609 627 iFluor 610琥珀酰亚胺酯          
iFluor 633 638 652 iFluor 633琥珀酰亚胺酯 iFluor 633马来酰亚胺        
iFluor 647 654 669 iFluor 647琥珀酰亚胺酯 iFluor 647马来酰亚胺 iFluor 647叠氮化物 iFluor 647炔烃 iFluor 647酰肼 iFluor 647胺
iFluor 660 660 677 iFluor 660琥珀酰亚胺酯         iFluor 660胺
iFluor 670 669 682 iFluor 670琥珀酰亚胺酯          
iFluor 680 683 700 iFluor 680琥珀酰亚胺酯 iFluor 680马来酰亚胺     iFluor 680酰肼 iFluor 680胺
iFluor 700 690 713 iFluor 700琥珀酰亚胺酯 iFluor 700马来酰亚胺     iFluor 700酰肼 iFluor 700胺
iFluor 710 712 736 iFluor 710琥珀酰亚胺酯         iFluor 710胺
iFluor 750 759 777 iFluor 750琥珀酰亚胺酯 iFluor 750马来酰亚胺     iFluor 750酰肼 iFluor 750胺
iFluor 790 786 811 iFluor 790琥珀酰亚胺酯 iFluor 790马来酰亚胺     iFluor 790酰肼 iFluor 790胺
iFluor 800 801 820 iFluor 800琥珀酰亚胺酯 iFluor 800马来酰亚胺        
iFluor 810 811 822 iFluor 810琥珀酰亚胺酯 iFluor 810马来酰亚胺        
iFluor 820 820 849 iFluor 820琥珀酰亚胺酯 iFluor 820马来酰亚胺        
iFluor 840 836 876 iFluor 840琥珀酰亚胺酯 iFluor 840马来酰亚胺        
iFluor 860 852 877 iFluor 860琥珀酰亚胺酯 iFluor 860马来酰亚胺        

 

部分经典染料和iFluor染料对比数据

1.iFluor350和AMAC对比

产品 量子产率 消光系数 亮度
iFluor 350 0.95 20,000 **
AMCA 0.53 19,000 *

2.iFluor488和5-FITC对比

产品 量子产率 消光系数 亮度
iFluor 488 0.9 75000 **
5-FITC 0.79 73000 *

3.iFluor555和TRITC对比

产品 量子产率 消光系数 亮度
iFluor 555 0.64 100000 **
TRITC 0.1 85000 *

4.iFluor647和Cy5对比

产品 量子产率 消光系数 亮度
iFluor 647 0.25(水性缓冲液中)(pH 7.2) 250000 **
Cy5 0.27(pbs中) 0.4(乙醇中) 250000 *

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