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锦囊:iFluor 系列染料大集合

 

        AAT Bioquest的iFluor 染料是一系列高度水溶性荧光染料,用于标记生物分子,如蛋白质和抗体。该系列染料涵盖紫外 - 可见
光到近红外光谱,该系列染料可以匹配任何仪器设置和多种多重检测组合。 iFluor 染料共轭物具有优异的亮度和光稳定性,优于大
多数AlexaFluor®共轭物和其他光谱相似的共轭物。
 

图1.将HeLa细胞与(Tubulin +)或不与(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育,然后与iFluor 488山羊抗小鼠IgG缀合物(绿色,左图)或Alexa Fluor 488山羊抗小鼠IgG缀合物(绿色,右图)孵育。 细胞核分别用Hoechst 33342(蓝色)染色。

 

iFluor 染料和其共轭物的特点:

1.亮度

iFluor 共轭物比其他光谱相似的共轭物(例如AlexaFluor®染料,荧光素染料,花青染料等)表现出更强的荧光。

2.光稳定性

iFluor 共轭物比光谱相似的共轭物更具光稳定性,荧光不易消失,有更多时间可以观察、照相。

3.水溶性

iFluor 活性染料具有高度水溶性。可以在没有有机溶剂的情况下进行缀合,得到在储存期间抗沉淀的缀合物。

4.pH不敏感

iFluor 染料在广泛的pH范围内具有强大的高荧光性。

5.仪器兼容性

iFluor 染料的吸收光谱与常见激发光源的主要输出波长相匹配。

6.颜色选择

iFluor 染料有多种不同颜色可供选择,从紫色(350 nm)到红外(860 nm)。

 

iFluor染料选择指南

 

 

反应目标(Reactive Targets)

染料名称

Ex(nm)

Em(nm)

替代品

胺(Amine)

巯基(Thiol)

醛基(Aldehyde)

炔烃(Alkyne)

叠氮化物(Azide)

iFluor 350

346

443

香豆素(Coumarin)/Alexa Fluor® 350/DyLight™ 350

#1020

 

#1060

#1080

#1070

 

 

iFluor 405

402

425

Cascade Blue®/Alexa Fluor® 405/DyLight™ 405

#1021

 

#1053

#1081

#1071

 

 

iFluor 430

433

497

Alexa Fluor® 430

#1052

 

#1054

 

 

 

 

iFluor 450

449

504

 

#1026

 

#1057

 

 

 

 

iFluor 488

491

518

Alexa Fluor® 488/DyLight™ 488

#1023

 

#1062

#1082

#1072

#1000

#999

iFluor 514

511

527

Alexa Fluor® 514

#1024

 

 

 

 

 

 

iFluor 532

536

560

Alexa Fluor® 532

#1025

 

#1061

 

 

 

 

iFluor 546

541

557

Alexa Fluor® 546

#1048

 

 

 

 

 

 

iFluor 555

552

567

Cy3®/Alexa Fluor® 555/DyLight™ 550

#1028

 

#1063

#1083

#1073

#1093

#1092

iFluor 568

568

587

罗丹明红色染料(Rhodamine Red)/Alexa Fluor® 568

#1049

 

#1055

 

 

 

 

iFluor 594

594

614

Texas Red®/Alexa Fluor® 594/DyLight™ 594

#1029

 

#1064

 

 

 

 

iFluor 610

605

627

Alexa Fluor® 610

#1038

 

 

 

 

 

 

iFluor 633

638

655

Alexa Fluor® 633

#1030

 

#1056

 

 

 

 

iFluor 647

649

664

Cy5®/Alexa Fluor® 647/DyLight™ 650

#1031

 

#1065

#1085

#1074

#1091

#1090

iFluor 660

662

678

Alexa Fluor® 660

#1032

 

 

 

#1075

 

 

iFluor 680

684

702

Cy5.5®/IRDye® 700/Alexa Fluor® 680

#1035

 

#1066

#1086

#1076

 

 

iFluor 700

685

710

Alexa Fluor® 700

#1036

 

#1067

#1087

#1077

 

 

iFluor 710

712

736

 

#1045

 

 

 

#1078

 

 

iFluor 750

749

775

Cy7®/Alexa Fluor® 750/DyLight™ 750

#1037

 

#1068

#1088

#1079

 

 

iFluor A7

758

784

BD H7/HiLyte Fluor™ 750

#1039

 

 

 

 

 

 

iFluor 790

782

811

IRDye® 800/Alexa Fluor® 790/DyLight™ 800

#1368

#1360

#1366

#1364

#1362

 

 

iFluor 800

801

820

 

#1379

#1375

#1378

 

 

 

 

iFluor 810

811

825

 

#1389

#1385

#1388

 

 

 

 

iFluor 820

822

852

 

#1399

#1395

#1398

 

 

 

 

iFluor 860

854

878

 

#1409

#1405

#1408

 

 

 

 

 

 

 

 

琥珀酰亚胺酯

马来酰亚胺

酰肼

叠氮化物

炔烃

反应形式(Reactive Forms)

 

 

iFluor 染料光谱特性(全)

 

染料名称

ε†
(cm-1M-1)

Φ*

CF at
260 nm1

CF at
280 nm2

iFluor 350

20,000

0.95

0.83

0.23

iFluor 405

37,000

0.91

0.48

0.77

iFluor 430

40,000

0.78

0.68

0.3

iFluor 450

40,000

0.82

0.45

0.27

iFluor 488

75,000

0.9

0.21

0.11

iFluor 514

80,000

0.83

0.25

0.11

iFluor 532

90,000

0.68

0.26

0.16

iFluor 546

100,000

0.67

0.25

0.15

iFluor 555

100,000

0.64

0.23

0.14

iFluor 568

100,000

0.57

0.34

0.15

iFluor 594

180,000

0.53

0.05

0.04

iFluor 610

110,000

0.85

0.32

0.49

iFluor 633

250,000

0.29

0.062

0.044

iFluor 647

250,000

0.25

0.03

0.03

iFluor 660

250,000

0.26

0.07

0.08

iFluor 680

220,000

0.23

0.097

0.094

iFluor 700

220,000

0.23

0.09

0.04

iFluor 710

190,000

0.14

0.12

0.07

iFluor 750

275,000

0.12

0.044

0.039

iFluor 790

275,000

0.13

0.1

0.09

iFluor 800

250,000

0.11

0.03

0.08

iFluor 810

250,000

0.05

0.09

0.15

iFluor 820

250,000

N/D

0.11

0.16

iFluor 860

250,000

N/D

0.1

0.14

†λmax处的消光系数

*荧光量子产率

1.260 nm处吸光度的校正因子

2.280 nm处吸光度的校正因子

 

图2.用小鼠抗微管蛋白染色的HeLa细胞的图像,然后用iFluor 594山羊抗小鼠IgG(红色,Cat#16548)染色。 用鬼笔环肽-iFluor 488缀合物(绿色,Cat#23115)染色肌动蛋白丝,并用DAPI(蓝色,Cat#17507)染色细胞核。

 

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