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百萤生物小科普:双波长比率钙指示剂选择指南

今天,百萤为大家精选了AAT Bioquest市售的双波长比率钙指示剂,它有哪些产品?它与单波长钙指示剂有什么区别?它有什么优势?如何选择五花八门的双波长比率钙指示剂?感兴趣的小伙伴一起来看看吧!


双波长比率钙指示剂

与单波长钙指示剂相比,双波长比率钙指示剂具有独特的光谱特性,这些光谱特性是响应结合钙而触发的。当与钙结合时,比例指示剂的最佳吸收率或发射波长强度都会发生变化。例如,双激发钙指示剂Fura-2,AMFura-8 ,AM在结合和不含钙时均显示两个峰值激发波长。当分别在结合钙的和无钙的峰值激发波长下激发时,钙浓度的增加会引发双激发指示剂的荧光发射强度的增加和减少。

双波长比率钙指示剂的优势:

  • 比例测定可准确测量细胞内钙浓度
  • 减少不均匀的染料加载,染料渗漏,光漂白和变化的细胞厚度(在混合种群中常见)的影响
  • 提供更可靠和可重复的结果
  • 双重激发或双重发射的指示剂
  • 活细胞钙分析的细胞渗透形式(与成像,流式细胞仪和微孔板检测(例如HTS)兼容)
  • 细胞不渗透形式,可通过微量注射,贴片移液器等进行上样

图1.测量CHO-K1细胞的ATP剂量响应。使用Fura-2 AM(#21023)和Fura-8 AM(#21056)。将CHO-K1细胞以40,000个细胞/ 100 µL /孔在黑色96孔板中接种过夜,然后与Fura-2 AM或Fura-8 AM钙测定染料上样溶液孵育1小时。ATP剂量由Flexstation添加。

 

双波长比率钙指示剂选择指南

下表列出了细胞渗透性双波长比率钙指示剂的规格,其吸收和发射最大值以及其钙解离常数等。请根据自己的实验选择最佳的试剂。(其他形式的试剂如钠盐、钾盐等,请参考下文“相关产品”)

  Fura-2,AM Fura-FF,AM Fura-8 ,AM Fura-8FF,AM Fura Red,AM Indo-1,AM Cal Red R525/650,AM
荧光产生原理 与钙结合后比例激发波长发生变化 与钙结合后比例发射波长发生变化
荧光变化原理 激发波长变化 发射波长变化
Ex / Em(nm)
(不结合钙时)
340/510 340/510 354/524 354/524 435/650 355/475 490/660
Ex / Em(nm)
(结合大量钙时)
380/510 380/510 415/524 415/524 471/650 355/400 490/525
ķ d 145 nM 5.5 µM 260 nM 6 µM 400 nM 230 nM 330 nM
形式 AM酯 AM酯 AM酯 AM酯 AM酯 AM酯 AM酯
渗透性 细胞可渗透
细胞加载 通过细胞培养基加载到活细胞中
规格 20x50 µg 10x50 µg 1 mg 10x50 µg 1 mg 20x50 µg 10x50 µg
货号 21023 21027 21055 20620 21046 21036 20591

相关产品

货号# 产品名称 Ex(nm) Em(nm) 规格
20588 Cal Red R525 / 650钾盐 492 650 5x50 ug
20590 Cal Red R525 / 650 AM 492 650 1mg
20591 Cal Red R525 / 650 AM 492 650 10x50 ug
20620 Fura-8FF ,AM 354 525 10x50 ug
20621 Fura-8FF ,五钾盐 354 415 10x50 ug
21020 Fura-2,AM * CAS 108964-32-5 * 363 512 1mg
21021 Fura-2,AM *超纯级* * CAS 108964-32-5 * 363 512 1mg
21022 Fura-2,AM * CAS 108964-32-5 * 363 512 50mg
21023 Fura-2,AM *超纯级* * CAS 108964-32-5 * 363 512 20x50 ug
21025 Fura-2,五钾盐* CAS 113694-64-7 * 363 512 1mg
21026 Fura-2,五钠盐 363 512 1mg
21027 Fura-FF,AM* CAS 348079-12-9 * 363 512 10x50 ug
21028 Fura-FF,五钾盐* CAS 192140-58-2 * 363 512 10x50 ug
21029 Fura-FF,五钾盐* CAS 192140-58-2 * 363 512 1mg
21030 Indo-1, AM* CAS 112926-02-0 * 346 475 1mg
21032 Indo-1, AM*超纯级* * CAS 112926-02-0 * 346 475 1mg
21033 Indo-1, AM* CAS 112926-02-0 * 346 475 50mg
21036 Indo-1, AM*超纯级* * CAS 112926-02-0 * 346 475 20x50 ug
21040 Indo-1,五钾盐* CAS 132319-21-9 * 346 475 1mg
21044 Indo-1,五钠盐 346 475 1mg
21045 Fura Red,钾盐 458 597 1mg
21046 Fura Red,AM * CAS 149732-62-7 * 458 597 1mg
21047 Fura Red, 钾盐 458 597 10x50 ug
21048 Fura Red, AM *CAS 149732-62-7* 458 597 10x50 ug
21050 Quin-2,AM * CAS 83104-85-2 * 353 495 1mg
21052 Quin-2四钾盐* CAS 149022-19-5 * 353 495 5mg
21055 Fura-8 ,AM 354 525 1mg
21056 Fura-8 ,AM 354 525 10x50 ug
21057 Fura-8 ,五钾盐 354 525 1mg
21058 Fura-8 ,五钠盐 354 525 1mg
36320 Screen Quest 免洗Fura-2钙检测试剂盒 370 476 10Plates
36321 Screen Quest 免洗Fura-2钙检测试剂盒 370 476 100Plates

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