百萤生物小科普：双波长比率钙指示剂选择指南

今天，百萤为大家精选了AAT Bioquest市售的双波长比率钙指示剂，它有哪些产品？它与单波长钙指示剂有什么区别？它有什么优势？如何选择五花八门的双波长比率钙指示剂？感兴趣的小伙伴一起来看看吧！

双波长比率钙指示剂

与单波长钙指示剂相比，双波长比率钙指示剂具有独特的光谱特性，这些光谱特性是响应结合钙而触发的。当与钙结合时，比例指示剂的佳吸收率或发射波长强度都会发生变化。例如，双激发钙指示剂Fura-2，AM和Fura-8 ，AM在结合和不含钙时均显示两个峰值激发波长。当分别在结合钙的和无钙的峰值激发波长下激发时，钙浓度的增加会引发双激发指示剂的荧光发射强度的增加和减少。

双波长比率钙指示剂的优势：

• 比例测定可准确测量细胞内钙浓度
• 减少不均匀的染料加载，染料渗漏，光漂白和变化的细胞厚度（在混合种群中常见）的影响
• 提供更可靠和可重复的结果
• 双重激发或双重发射的指示剂
• 活细胞钙分析的细胞渗透形式（与成像，流式细胞仪和微孔板检测（例如HTS）兼容）
• 细胞不渗透形式，可通过微量注射，贴片移液器等进行上样

图1.测量CHO-K1细胞的ATP剂量响应。使用Fura-2 AM（#21023）和Fura-8 AM（#21056）。将CHO-K1细胞以40,000个细胞/ 100 µL /孔在黑色96孔板中接种过夜，然后与Fura-2 AM或Fura-8 AM钙测定染料上样溶液孵育1小时。ATP剂量由Flexstation添加。

双波长比率钙指示剂选择指南

下表列出了细胞渗透性双波长比率钙指示剂的规格，其吸收和发射大值以及其钙解离常数等。请根据自己的实验选择佳的试剂。(其他形式的试剂如钠盐、钾盐等，请参考下文“相关产品”)

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